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熒光濾色塊是熒光顯微鏡的核心部件,內裝激發、發射和半透半反濾光片(又稱二向色鏡)。熒光光源透過濾色塊時,某個激發波段的光線被過濾,經過半透半反濾色片的反射,經物鏡匯聚后,進入樣品實現激發,發射出特定波段的熒光透過發射濾光片,被檢測器捕捉到,形成熒光圖像,完成熒光檢測。
簡單來說由3個濾色片組成:
(1)激發濾片:從汞燈發出的光源選擇出特定波長的光,譬如340-380帶通,就是指340-380的波長的光都可以透過。
(2)分光二向色鏡:作用是令短波長的光(激發光)反射,長波長的光(熒光)透射。譬如說 400nm分光,指低于400nm的光反射經物鏡照到樣品,然后激發出來的熒光透射過二向色鏡到達發射波濾片。
(3)發射濾片:用來選擇染料的特定發射光。譬如 415長通,就是指大于415nm的光透射,低于415nm的光全部阻斷。作用主要是擋住其他染料的熒光或者反射光。
其實,顯微鏡廠家都不生產濾片,只是購買濾色片廠家的成品進行加工。
著名的三大濾色片生產商:
(1)Chroma
Chroma于1991年5月成立,它專業生產紫外、可見、近紅外波段的濾色片,包括單一帶寬、多個帶寬、長通、短通濾色片,也生產分光鏡、二向分色鏡和激光濾色片等。他們的特點是能進行精密的光譜控制,制造過程是在真空下將兩到三種材質的薄層精確地沉積在玻璃或其他透明物質上。 目前, Chroma是四大廠家中三個的主要供應商,是另一個的二級供應商。可見Chroma在熒光顯微鏡濾色片行業的地位!
(2)Omega
Omega成立于1969年,一直專注于為熒光顯微鏡提供濾色片,它生產的干涉濾光片在世界范圍內是一流的產品。被廣泛應用于波長從紫外到紅外包羅萬象的領域;從用于光譜測定、臨床診斷的頻帶濾光片,和用于熒光發射、電視和攝影的顏色分離的長/短通道濾光片,到應用于熒光顯微鏡上光譜特定區域上佳反射和另一區域佳透射的二向色分光鏡、激光濾光片、解析濾光片等等,產品眾多,應用廣泛,在工農業、生物科學、科研教育領域發揮著無與論比的作用。 和Chroma相比,Omega的價位要低些,因此市場占有量更高些。
(3)Semrock
Semrock有三種主要產品:為熒光設備制作的光學濾色片、拉曼設備濾片和激光分析濾片。所有的Semrock光學濾片都是由硬離子束噴鍍涂層的,這樣的產品非常穩定。頂尖產品BrightLine熒光濾片能夠大大改善熒光顯微鏡的表現;高鑒別性RazorEdgea濾片專為拉曼系統設計;獨特的超寬頻帶MaxMirror是激光分色鏡。
和以上兩個公司相比,Semrock公司的產品特點就是所有的濾色片都是硬鍍膜的,同時價格也不菲。
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